Jak identifikovat grampozitivním tyče

Od 1880s ,skvrna zkušební Gram zůstávádůležitá metoda bakteriální identifikaci a klasifikaci . Mikrobiologů často provést zkoušku Gram jako první krok v identifikaci konkrétní typy tyčinkovité bakterie z rodu Bacillus . Gram barvení je jmenován pro jeho vynálezce , dánský bakteriolog Hans Christian Gram . Technika práce z důvodu rozdílu v gram pozitivní a gram-negativní bakteriální buněčné stěny fyziologie . Některé grampozitivní tyče způsobit vážné onemocnění, jako je antrax a tetanus.Things budete potřebovat
šatech laboratoře
Rukavice
Čištění krytiny
Tlakový hrnec
bakterie kolonie
Agar
Petri nádobí
Water
Očkování smyčka
sklíčko
methanol
Bunsen hořák
Crystal fialové skvrny
jódu skvrn činidla
Decolorizer
Safranin
Fuchsin řešení
Savý papír
Mikroskop
Zobrazit další instrukce dovolená 1

Zajistěte použití čisté , aseptické laboratorních prostor k provádění skvrn testu Gram . Noste čisté laboratorní oděv a boty krytiny , aby se zabránilo kontaminaci . Při manipulaci s bakteriální kultury používejte rukavice a masku . Izolovat kolonie bakterií pro testování a pěstovat ji na živiny bohaté agaru v Petriho miskách . Před použitím sterilizujte v Petriho miskách a agar tlakovém hrnci .
2

Přidá se několik kapek čisté vody na kultivační misky . Distribuovat rovnoměrně na agaru . Přetáhněte inokulace smyčku lehce přes povrch agaru je . Přeneste vzorek na sklo čisté sklíčko a potřete rovnoměrně v kruhové oblasti o velikosti desetník . Udržujte velikostvzorku minimální; měli byste být sotva vidět pouhým okem .
3

Aplikujte 95 procent methanolu po prezentaci nátěru po dobu dvou minut na opravu buněk a zabránění narušení jejich morfologie . Air suché snímek nebo teplo jemně ji na mírném plameni hořáku Bunsenovým . Přesuňte snímek back- a-dále se teplo rovnoměrně a vyhnout lokalizované horké skvrny . Aplikujte teplo rovnoměrně a důsledně . Vyvarujte se snímek z plamene až budete hotovi zahřátí .
4

Pour krystal fialový flek činidlo přes pevnou snímku . Nechte odstát po dobu 30 až 60 sekund. Omyjte skvrnu pod tekoucí vodou po dobu několika sekund . Vypusťte přebytečnou vodu ze snímku . Zakryjte snímek s jódu skvrn činidlem dobu 30 až 60 sekund. Omyjte jód s vodou z vodovodu . Nakloňte sklíčko a přidejte několik kapek Decolorizer . Použijte ji doodtoku čisté . Umyjte snímek .
5

Namočte snímek s růžovo- barevné safraninovým proti barvicím činidlem po dobu 30 sekund . Můžete nahradit základní fuchsin řešení pro Safranin . Jemně omyjte snímek a chvění přebytečné vody . Vymaž ji osušte savým papírem a pak se usuší na vzduchu snímek . Zkontrolujte připravené sklíčko pod mikroskop se zdrojem světla . Podívejte se na identifikaci a grampozitivním bakteriím tyče s modrým nebo fialovým zbarvením od skvrn testu Gram .