Rozdíl mezi Severním a amp; Southern blotting

Biologie jevýzvou pro mnoho důvodů. Jedním z těchto důvodů je obtížné při studiu makromolekul --- molekuly , které obsahují stovky či tisíce malých molekulárních jednotek svázané dohromady . Je-li pouze jeden nebo dva z těchto menších molekulárních jednotek jsou odloženy , makromolekuly mění své vlastnosti . Biologové je třeba nějakým způsobem měřit velmi malé změny ve velmi velké molekuly. Samozřejmě, že "velký" neznamená, že dostatečně zvládnout a vidět velký, aby se biologové potřebují speciální nástroje, aby taková měření . Blotting je jeden z těchto nástrojů . Gelová elektroforéza

Všechny psací techniky začínají gelové elektroforézy . Gel je více nebo méně jako tenký obdélník želatiny . Malé množství speciálně připravených biologických molekul je kladen na gelu na jednom konci , pakelektrické pole je aplikováno z jednoho konce na druhý . Připravené molekuly jsou elektricky nabité , takžeelektrické pole je táhne přes gel . Pohybují se pomalu přes hustý gel , dokudpole je vypnutý. Lehčí molekuly si vytáhl rychleji a pohybovat se dále těžší molekuly trvat déle, než se pohybovat tak , že nedělají to tak daleko .
Použití Gely

v praxi , několik různých vzorků se odložil šíří podél jednoho okraje gelu . Poté, co se aplikujeelektrické pole , různé vzorky rozprostřeny míří opačným okraje gelu . Šíření každého vzorku se nazývá" dráha . " Dráha bude obvykle mít několik různých pásem odpovídající molekuly s různými hmotnostmi v každém vzorku . Existuje několik různých způsobů, jak dělat kapely viditelné. Analýza gel dává biologové představu o velikosti jednotlivých molekul , ale získat více informací , je potřebajiný způsob . To je místo, kde přichází v blotting .
Blotting

Odsávací jezpůsobem, jak vzít molekuly , které se šíří od sebe v gelu a jejich zpřístupnění více analýza . Stejným způsobem, savý papír pohltí uvolněný inkoust --- nebo bylo v dobách, kdy lidé používají plnicí pera --- biologický blotting " pohltí " molekuly z gelu do jiného materiálu . Molekuly končí ve stejném vzoru , ale nyní ve zvláštním papíru nebo plastové fólie . Molekuly si vázán na listu tak, aby se nemohly posunout víc , a pak mohou být namočen do roztoku dalších molekul sondy , které poskytují další informace o molekulách . Existuje několik různých způsobů, jak dělat tyto kroky , ale princip je stejný pro všechny z nich .
Jižní , severní a západní blotting

Biolog Edwin Southern byl první vyvinout techniku ​​blot . On vyvinul veškeré potřebné informace , aby si být jisti , že gelová elektroforéza DNA by mohla být přesně přeneseny a měří v savý materiál. Tato metoda byla pojmenována po něm : Southern blotting . Jiní vědci přišel na to, jak udělat stejnou základní techniky práce pro RNA a --- v typickém zábavu milující vědec stylu --- volal jejich podrobné metody Northern blotting . Později , postup byl upraven pro měření proteinů , a byl nazýván westernový přenos . Všechny tři metody používají stejné zásady: . Jižní opatření DNA , Northern opatření RNA , západní opatření bílkoviny