Jaký jevztah mezi Opraveno optické hustoty a počtu buněk ?

Optická hustota -míra , do jaké míry je látka propouští světlo - je často používán k měření koncentrace buněk nebo částic, které jsou rozptýleny , avšak dosud nebyly zrušeny , v tekutiny . Korigovaná Optická hustota tohoto typu směsi , známé jako suspenze , je přímo úměrná koncentraci , hustotu nebo počet buněk rozptýlených v něm . Beer - Lambert právo

zákon Beer - Lambert , který uvádí, že absorbance je přímo úměrná nebo má lineární vztah , koncentraci absorbující druhů , je pravda jen pro optické hustoty pod 0,4 . Nicméně , vzorky s optické hustoty vyšší než 0,4 lze ředit definovaným faktorem ředění a jejich optické hustoty měřené . Jsou-li naměřené hodnoty dělí faktorem zředění , za vzniku opravený optickou hustotu , tato nová hodnota je přímo úměrná počtu buněk ve vzorku .
Spektrofotometr

Optická hustota se měří na zařízení, známého jako spektrofotometru , který porovnává jas světla vyzařovaného ze dvou zdrojů , z nichž jeden má některé standardní vlastnosti . Jak světlo prochází buněčné suspenze ,světlo rozptýlené buňkami tak, že menší z nich dosáhne fotoelektrický článek -elektronické zařízení , jehož výstupní elektrický se liší v závislosti na síle světla dopadajícího na ni - v spektrofotometru . To znamená, že čím vyšší je počet buněk v suspenzislabšíelektrický výstup fotoelektrického článku a vice versa .
Optická hustota Korekce

na optický hustoty nad 0,4 , tituly , na které buňky mohou být zastíněné jinými buňkami nebo odrážet světlo mnohokrát není zanedbatelná. Při vyšších optické hustoty ,nekorigovaná optická hustota buněčné suspenze již není přímo úměrná počtu buněk . Nicméně ,nekorigované optická hustota zředěných suspenzí buněk je téměř úměrná jejich přesně známo, relativní hustoty - poměr jejich hustot k tomu referenční látky , jako je voda - tak to jerozumné pracovní předpoklad, žebez korekce optická hustota suspenze vysoce zředěné buněk je , ve skutečnosti , je to pravda optická hustota .
Relativní optická hustota

vynásobením relativní hodnotu hustoty každé buněčné suspenze ozákladní optická hustota hodnoty získané z vysoce zředěné suspenze buněk , je možné získat opravený optickou hustotu . Nicméně, abyměření co nejpřesnější ,základní hodnota optické hustoty by měly být získány z několika spektrofotometrických čtení .